Resumo da Pesquisa:
Atualmente, as doenças crônicas não-transmissíveis permanecem como as principais causas de mortalidade e morbidade no mundo. Entre elas, o câncer representa a segunda principal causa de morte, atrás apenas das doenças cardiovasculares; sendo que o câncer de mama se destaca como um dos tipos mais incidentes e letais, exigindo ainda, novas abordagens terapêuticas. Nesse contexto, estudos anteriores têm reportado o potencial anticancerígeno de peptídeos derivados de alguns grãos de leguminosas, com destaque para as proteínas da soja que têm sido extensivamente investigadas. Por isso, esta pesquisa teve como objetivo central – avaliar a ação de peptídeos derivados da proteína β-conglicinina da soja, com efeito sobre a proliferação celular de adenocarcinoma mamário (MDA-MB-231), através de abordagem em in sílico e in vitro. Para tanto, foi realizado uma triagem para seleção de peptídeos com predição de interação molecular com a proteína Bcl-2. Doze peptídeos (ASVSVSF, QEEEH, EEQEW, GTAIL, AIVIL, VIPAGY, AIVVL, EQQQR, ATSDL, PGSAK, ASVCVSL e VIPAAY) com cinco ou mais resíduos de aminoácidos foram preditos com ação anticâncer (ACPred ≥ 0.800). Desses, sete sequências interagiram com as cavidades P2 e P4 do domínio BH3 da proteína Bcl-2, e tiveram o perfil de interação molecular estabelecido e comparado a droga comercial venetoclax. Somente os peptídeos ASVCVSL, ATSDL e EEQEW apresentaram tendências para estruturação helicoidal, condição essencial para ajuste no domínio BH3. Esses peptídeos foram sintetizados, e nos ensaios in vitro reduziram de forma dose-dependente (concentração 25–800 µM) a viabilidade celular da MDA-MB-231. O tratamento com o ASVCVSL, ATSDL e EEQEW levou ao decréscimo em 87, 69 e 42% do crescimento das células quando tratadas com a concentração de 800 µM, respectivamente, comparado ao controle. Embora, a ação do peptídeo ASVCVSL (IC50 = 113.8 µM) tenha sido mais significativa, comparado ao ATSDL (IC50 = 205 µM) e EEQEW (IC50 = 1520.6 µM), ele apresentou o menor índice de seletividade (0,35). Posteriormente, a morte celular foi analisada pela indução da apoptose. O tratamento com os peptídeos ATSDL e EEQEW mostrou um aumento na ligação da anexina V em 3.2 e 5.5-fold e 1.3 e 3.1-fold, enquanto o venetoclax aumentou em 2.1 e 5.3-fold nos tratamentos por 24 e 48 h, respectivamente. Além disso, a indução da apoptose foi acompanhada da diminuição significativa da concentração da proteína Bcl-2, nos tratamentos com o ATSDL, EEQEW e o venetoclax. No entanto, os resultados previstos in sílico sugeriram que os dois peptídeos avaliados apresentam baixa absorção e biodisponibilidade, comparados ao venetoclax. Portanto, o presente estudo apresenta evidências que os peptídeos ATSDL e EEQEW derivados da proteína β-conglicinina da soja, podem exercer ação pró-apoptótica sobre o câncer de mama, por meio modulação da proteína-alvo Bcl-2.
Palavras-chave: Peptídeos bioativos. Bcl-2. BH3 miméticos. Docking Molecular. Apoptose.